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通用型反相液相色譜柱在使用緩沖液的過程中要注意這幾點(diǎn)

更新日期：2019-06-26 信息來源：本站瀏覽次數(shù)：3400

通用型反相液相色譜柱優(yōu)點(diǎn)是固定相穩(wěn)定，應(yīng)用廣泛，可使用多種溶劑。但硅膠為基質(zhì)的填料，使用時(shí)一定要注意流動(dòng)相的PH范圍。一般的C18柱PH值范圍都在2-8，流動(dòng)相的PH值小于2時(shí)，會(huì)導(dǎo)致鍵合相的水解；當(dāng)PH值大于7時(shí)硅膠易溶解；經(jīng)常使用緩沖液固定相要降解。

通用型反相液相色譜柱在使用前，要進(jìn)行柱的性能測(cè)試，并將結(jié)果保存起來，作為今后評(píng)價(jià)柱性能變化的參考。在做柱性能測(cè)試時(shí)要按照色譜柱出廠報(bào)告中的條件進(jìn)行(出廠測(cè)試所使用的條件是較佳條件)，只有這樣，測(cè)得的結(jié)果才有可比性。但要注意：柱性能可能由于所使用的樣品、流動(dòng)相、柱溫等條件的差異而有所不同。

通用型反相液相色譜柱在使用緩沖液的過程中還要注意以下幾點(diǎn)：

　　a.避免使用鹽酸鹽，鹽酸鹽對(duì)鋼質(zhì)有腐蝕作用;

　　b.緩沖液要現(xiàn)配現(xiàn)用，往往緩沖液是良好的菌類培養(yǎng)液，隔天或放置長時(shí)間實(shí)驗(yàn)時(shí)會(huì)發(fā)生很多怪現(xiàn)象;

　　c.使用緩沖液要及時(shí)掌握pH范圍，做到胸中有數(shù);

　　d.清洗液路和柱子時(shí)，有溫控可加熱到30攝氏度易于沖洗;

　　e.長時(shí)間用緩沖溶液要注意觀察接頭處有無析出，若有白色鹽類析出，定期用10%硝酸沖洗液路(拆下柱子，沖洗30mL10%硝酸溶液，再用5倍水沖洗)可以避免液路的堵塞;

　　f.選擇緩沖液要用可靠的試劑，避免不純的鹽類造成不必要的麻煩;

　　過渡流動(dòng)相是指有機(jī)相和水相的組成與分析流動(dòng)相相同，但是不含緩沖鹽的溶液。

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